▎技术原理 :
GST pull-down是体外研究蛋白与蛋白互作的有力工具。该技术将GST标签融合表达的诱饵蛋白,特异性结合谷胱甘肽亲和凝胶或磁珠,而后与细胞裂解液共孵育,纯化出与GST融合表达的诱饵蛋白,顺利获得洗涤、洗脱得到的蛋白产物,利用western-blot检测特定蛋白是否与猎物蛋白结合;或顺利获得质谱鉴定筛选出与诱饵蛋白可能互作的蛋白信息。
▎技术优势 :
● 特异性高:GST能够与谷胱甘肽特异性结合,确保捕获的蛋白质是目标蛋白及其结合伙伴;
● 简单易行:操作相对简单,不依赖抗体和转染/遗传转化/转基因限制;
● 应用范围:不受物种限制,在体外系统中研究蛋白质之间的相互作用;
● 灵活应用:既可以检测2个蛋白质间的直接相互作用,也可借助质谱筛选诱饵蛋白相互作用的其他蛋白。
▎原理示意图 :

▎客户给予 :
① 诱饵蛋白具体信息
② 猎物蛋白具体信息(鉴定时需要)
③ 样本(筛选时需要):细胞、原生质体2*107;植物/动物组织1g;菌液0.5g
注:样本应在适宜的条件下运输。样品需-20℃冻存,冰袋运输。
▎服务流程 :


▎服务说明 :

▎结果交付 :
① 目标载体的双酶切胶图及测序结果;
② 蛋白纯化考染图;
③ Pull Down后蛋白银染胶图;
④ 诱饵及猎物蛋白WB图(鉴定);
⑤ 质谱的下机数据及个性化的生信分析(筛选) ;
⑥ 原始数据及原始图片(筛选) ;
⑦ 标准的项目结题报告 。
▎案例展示 :

▎服务保障 :




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